Napsin A

הדפס

מדריך בדיקות מעבדה
Napsin A
מעבדה	פתולוגיה ברקמת ביופסיה
תחום	אבחנה מבדלת בין אדנו-קרצינומה ראשונית ריאתית לבין סוגי סרטן ריאות אחרים.
יוצר הערך	פרופ' בן-עמי סלע

לערכים נוספים הקשורים לנושא זה, ראו את דף הפירושים – סרטן ריאות

בסיס פיזיולוגי

סרטן ריאות הוא סוג הסרטן המאובחן בשכיחות הגדולה ביותר (1.6 מיליון מקרים חדשים מדי שנה) , והוא מהווה סיבה מובילה בתמותה מסרטן בעולם (Bishop וחב' ב-Hum Pathol משנת 2010, ו-Ueno וחב' ב-Br J Cancer משנת 2003). רוב המקרים של סרטן ריאות מתגלים לראשונה בשלב מתקדם של המחלה, עם שיעור הישרדות ל-5 שנים של 14% בלבד. ל-napsin A יש תפקיד בעיבוד של surfactant B הריאתי המיוצר על ידי פנאומוציטים אלבאולריים type II‏ (Brasch ןחב' ב-Biol Chem J משנת 2003, ו-Ueno וחב' באותו כתב עת משנת 2004), מה שהפך את napsin A לסמן פוטנציאלי של אדנוקרצינומה ראשונית של הריאות.

משנת 2004 דיווחו Rosai וחב' ב-9th Ed Ackerman's Surgical Pathology, על כך שגידולים פרימריים של מערכת הנשימה מתחלקים למספר סוגים היסטולוגיים, כאשר רובם מהווים שאתות ממאירות ממוצא אפיתליאלי. בקבוצת שאתות אלה, רוב המקרים מסווגים כ-non-small cell lung carcinomas (להלן NSCLCs) ומהווים כ-80% מכלל סרטני הריאות, או כ-small cell carcinomas (להלן SCCs), המהווים את שארית 20% של סרטן הריאות (Colby וחב' ב-Atlas Tumor of Pathology משנת 1994). ההערכה המקובלת היא שרוב המקרים של NSCLC מורכבים מ-adenocarcinoma (כ-40%) ומ- squamous cell carcinoma ו-large cell carcinoma.

בעבר, די היה באבחון קרצינומה ראשונית של הריאה כ-NSCLC או כ-SCC למטרות טיפוליות. אך עם הפיתוח של תרפיות חדשות ויעילות לטיפול ב-adenocarcinoma, חיוני במידת האפשר לסווג את תת הסוג של NSCLC. טיפולים אלה כוללים א) תכשירים המכוונים כנגד מוטציות בקולטן של EGF, וכנגד גנים מוטנטים הגורמים לאיחוי של האנזים ALK או anaplastic lymphoma kinase המזרחן את טירוזין קינאזה בקולטני תאים, עם חלבונים אחרים דוגמת EML4, כאשר הצמד EML4-ALK הוא אונקוגני ואחראי ל-3-5% מכלל מקרי NSCLC. הגנים של איחוי ALK נמצאים כמעט באופן בלעדי ב-adenoacrcinoma (Soda וחב' ב-Nature משנת 2007, Sasaki וחב' ב-Eur J Cancer משנת 2010, ו-McDermott וחב' ב-Cancer Res משנת 2008); ב) התכשיר bevacizumab שהוא נוגדן חד-שבטי כנגד VEGF, המשמש כטיפול קו-ראשון באדנוקרצינומות רבות, אך עלול לגרום דימום חמור ואף מסכן חיים במטופלים עם קרצינומה של תאי קשקש; ג) תכשיר חדש יחסית כמו pemetrexed עשוי להיות יעיל באדנוקרצינומה אך לא בקרצינומה של תאי קשקש. לכן קריטי לסווג באופן מדויק ככול האפשר את סוג סרטן הריאה כדי להקל על שיקולי הטיפול האופטימאלי (Loo וחב' ב-J Thorac Oncol משנת 2010, וכן Rossi וחב' ב-Curr Med Chem משנת 2010, כמו גם Cagle ו-Dacic ב-Arch Pathol Lab Med משנת 2011 ו-Travis וחב' ב-J Thoacic Oncol משנת 2011).

הריאות הן גם יעד מקובל לגרורות של שאתות מאזורי גוף אחדים, כולל סרטני שד, סרטן מערכת העיכול, וסרטן מערכת השתן והרבייה. אדנוקרצינומה גרורתית ממקור ראשוני בלתי-ידוע מהווה 3-5% מכלל השאתות הממאירות, ובתור שכזו מהווה אחת מתוך 10 סוגי הסרטן השכיחים ביותר באדם (Pavlides וחב' ב-Eur J Cancer משנת 2003, ו-Varadhachary ב-Cancer משנת 2004). חתכים של רקמות סרטניות הצבועים בצביעת hematoxylin-eosin מהווה עדיין השיטה הנפוצה ביותר לפיה מסווגים סרטני ריאה, אך הסיווג של NSCLC ושל סוגי סרטן עם דרגת דיפרנציאציה נמוכה יותר קשה להשגה על ידי צביעת HE בלבד (Field וחב' ב-J Natl Cancer Inst משנת 2004 ו-Stang וחב' ב-Lung Cancer משנת 2006).

בשנים האחרונות התבלטה הגישה של שיטות אימונו-היסטוכימיות כמכשיר עזר לאבחון מבדיל של קרצינומות של הריאה, בין אם הן שאתות ראשוניות של הריאה או שהם גרורות של שאתות שמקורם באיברים כגון מעי גס, שד, ערמונית, קיבה, כליות, שלפוחית השתן, שחלות ורחם. למרות שנכון לשנת 2013 לא קיים סמן מוסכם של שאת ריאתית, מאמצים לאתר סמן כזה היו בהחלט נמרצים. למרות שתאי-גזע פרוגניטוריים נחשבים כמועמדים הולמים לגישה אימונו-היסטוכימית לסיווג ומיון של קרצינומות של הריאה, לא נרשמה עדיין התקדמות מרשימה בתחום זה (Moreira וחב' ב-Mod Pathol משנת 2012).

תכונות napsin A כאנזים ממשפחת ה-aspartic proteinases

אנזימי aspartic proteinases שייכים למשפחת האנדו-פפטידאזות, והם מכילים 2 שיירי חומצה אספרטית באתר הפעיל שלהם, כל אחד מהשניים במקטע (domain) נפרד (Khan ו--Jamesב-Protein Sci משנת 1998). חברים אחרים במשפחת אנזימים זו הם ,cathepsin E cathepsin D , רנין, פפסין, gastricin ,chymosin של בקר. רבים מהאנזימים הללו נחקרו באופן מקיף, שכן תפקידם הפיזיולוגי מוגדר היטב, והם קשורים למצבים פתולוגיים כגון סרטן ( Rochefort ב-Acta Oncol משנת 1992) ומחלות אחרות (Kay וחב' ב-Protease Role in Health & Dis משנת 1988). בסוף שנות ה-90 תואר בבני-אדם ובעכברים האנזים A napsin שהואaspartic proteinase המופיע כשני איזופורמים napsin A ו-napsin B -ביניהם יש הומולוגיה של 85% ( Tatnell וחב' ב-FEBS lett משנת 1998). מייחסים ל-napsin A תפקיד בבשלות של surfactant הריאות הפעיל. העובדה שה-mRNA של napsin A ממוקם באופן ספציפי ברקמת הריאות והכליות, מצביעה על תפקיד ביולוגי שונה מזה של aspartic proteinases אחרים (Suzuki וחב' ב-Pathol Res Pract משנת 2005).

ל-napsin A שהוא חלבון מונומרי, משקל מולקולארי של 38,000 דלטון, והוא מכיל 420 חומצות אמינו. החלבון מקודד על ידי הגן NAPSA הממוקם בכרומוזום 19 בעמדה 19q13.33 והוא מכיל 10 אקסונים (Cook וחב' ב-Biochim Biophys Acta משנת 2002). הנקודה האיזואלקטרית של napsin A היא 5.29.

הערכה השוואתית של Napsin A, 5/6 cytokeratin, p63 ו- thyroid transcription factor 1 באבחון אדנוקרצינומה לעומת squamous cell carcinoma של הריאה

Whithaus וחב' ב- Arch Pathol Lab Med משנת 2012 דיווחו על אבחנה מבדלת בין אדנוקרצינומה של הריאה לבין סוגי ממאירויות ראשוניים אחרים של הריאה חשובה קלינית. קלסיפיקציה מורפולוגית מדויקת נמנעת לרוב כיוון ש-70% מסרטני הריאה מאובחנים על בסיס של FNA או על בסיס דגימות המתקבלות על ידי ביופסיה טרנס-ברונכיאלית. למרות ש- thyroid transcription factor 1 (להלןTTF-1 ) נחשב היסטורית כסמן הספציפי ביותר של אדנוקרצינומה של הריאה, התברר ש-napsin A הוא סמן יותר רגיש ויותר ספציפי מ-TTF-1. במחקר המתואר בוצעה הערכה מורפולוגית של 291 דגימות משאתות ריאה (מתוכן 165 מקרי אדנוקצינומה, ו-66 מקרי squamous cell carcinomas). צביעות אימונו-היסטו-כימיות ל-4 הסמנים המוזכרים בוצעו על רקמות microarray של ביופסיה מקובעות בפורמלין.

תוצאות המחקר היו כדלקמן: ל-Napsin A נמצאה רגישות של 83% וספציפיות של 98%; ל-TTF-1 נמצאה רגישות של 60% וספציפיות של 98% לאדנוקרצינומה. ל- cytokeratin 5/6 נמצאה רגישות של 53% וספציפיות של 96%, ול-p63 נקבעה רגישות של 95% וספציפיות של 86% ל- squamous cell carcinoma. פאנל של Napsin A ו-p63 נמצא בעל רגישות של 96% וספציפיות של 94% לאבחנה מבדלת של אדנו-קרצינומה מ-squamous cell carcinoma. כלומר, שילוב של 2 סמנים,napsin A ו-p63, הוא האידיאלי לאבחנה מבדלת בין 2 שאתות הריאה האמורות. מחקרים אחדים תומכים ב-Napsin A כסמן בעל רגישות גבוהה של 59-100% לאדנוקרצינומה של הריאה (Kadivar ו-Boozari ב-Appl Immunohistochem Mol Morphol משנת 2013, Bishop וחב' ב-Hum Pathol משנת 2010, Terry וחב' ב-Am J Surg Pathol משנת 2010 ו-Mukhopadhyay ו-Katzenstein ב-Am J Clin Pathol משנת 2012), ספציפיות גבוהה של ,88-94%, ערך ניבוי חיובי (ppv) של 78-90%, וערך ניבוי שלילי של 72-96% (Turner וחב' ב-Arch Pathpol lab med משנת 2012).